CM-3132. Gene therapy for Dravet Syndrome

Síndrome de Dravet

Target: SCN1A

  • El síndrome de Dravet (SD) es una encefalopatía grave caracterizada por convulsiones refractarias de inicio infantil, asociadas a alteraciones intelectuales, conductuales y motoras, así como a un mayor riesgo de muerte súbita. En la mayoría de los casos (~90%), la base genética es la haploinsuficiencia causada por mutaciones en el gen SCN1A, que codifica un canal de Na+ dependiente de voltaje de tipo 1 (Nav1.1).
  • Los fármacos antiepilépticos actuales tienen una eficacia limitada en el SD, a pesar de la agresiva terapia combinada.
  • Debido a la compleja fisiopatología del SD, los enfoques etiológicos como la terapia génica tienen posibilidades únicas de obtener una mejora global en la vida de estos pacientes.
  • Los vectores de adenovirus dependientes de la ayuda (HD-AdV) son herramientas muy prometedoras para la administración de genes terapéuticos, ya que presentan una alta capacidad de clonación (>30 Kb), y combinan la expresión a largo plazo con una alta eficiencia de transducción.

  • Keywords:
  • Terapia génica
  • ,
  • Síndrome de Dravet
  • ,
  • Encefalopatías
  • ,
  • Enfermedades raras
  • Early Discovery
  • Discovery
  • Preclinical
  • Clinical
  • Diagnostics

Alcance del problema

  • El SD es una enfermedad cerebral rara con una incidencia media de 1:20.000 nacimientos. Hasta ahora no existe un tratamiento curativo y los actuales fármacos antiepilépticos presentan una eficacia limitada.
  • La gran mayoría de los casos de SD están causados por mutaciones heterocigotas de novo en SCN1A, que codifica para el canal Nav1.1, fundamental para la actividad neuronal. Otras mutaciones, que probablemente causan una reducción parcial de la función del canal NaV1.1, se asocian con frecuencia a otros trastornos neuropsiquiátricos, como las convulsiones febriles, la epilepsia genética con convulsiones febriles plus (GEFS+), el autismo, la discapacidad intelectual, la migraña hemipléjica familiar y el deterioro cerebral relacionado con la edad.
  • La pérdida de función de los canales Nav1.1 altera las corrientes de sodio y el disparo del potencial de acción en las neuronas inhibidoras GABAérgicas, provocando una hiperexcitabilidad cerebral general que conduce a las convulsiones e invalida las manifestaciones neuropsiquiátricas.

HD-Ad vectors

  • Alta capacidad de clonación (>30 Kb) y estabilidad genética, que permite la entrega de genes grandes como el SCN1A (~6 Kb) y secuencias reguladoras complejas.
  • Expresión a largo plazo con alta eficiencia de transducción in vivo.
  • Los genes transportados por los vectores HD-Ad han sido transducidos eficientemente en el cerebro.

HD-AdV-SCN1A

  • Se han generado varios vectores HD-AdV-SCN1A, que llevan el gen SCN1A bajo el control de diferentes promotores, y se ha probado su expresión in vitro y en modelos animales (ratones C57BL/6 Scn1a wt/mut).

Prueba de concepto

In vitro: El ADNc de SCN1A es propenso a acumular reordenamientos. Para evitar este problema, se empleó un ADNc optimizado para el codón. La versión optimizada es estable y permite una producción eficiente de Nav1.1 (A, B). Los registros de patch-clamp de una sola célula demuestran que el Nav1.1 transgénico es capaz de cambiar el potencial de membrana. Como se esperaba para un canal Nav, la tetradotoxina (TTX) bloqueó la proteína, suprimiendo el cambio en el potencial de membrana (C). Sobre la base de estos resultados, se construyó un vector HD-AdV que alberga un promotor constitutivo fuerte y el ADNc de SCN1A, se purificó y se utilizó para infectar líneas celulares neuronales, dando lugar a una fuerte producción de Nav1.1 (D).

In vivo: Una vez inyectado estereotácticamente en el cerebro, el vector indujo una expresión significativa de Nav1.1, que fue especialmente notable en el cerebelo (E). El tratamiento fue bien tolerado y se observó una mejora de las señales electroencefalográficas. Se están realizando estudios para demostrar el efecto terapéutico dependiente de la dosis.

Ventaja competitiva

Los HD-AdV son adecuados para la terapia génica del SD. Nuestro grupo cuenta con la experiencia necesaria para producir este tipo de vectores y afrontar los retos que impone esta enfermedad. Además, la creación de un vector cerebral robusto allanará el camino para los tratamientos con GT de otras enfermedades neurológicas y neurodegenerativas.

Icono propiedad intelectual Propiedad Intelectual

Solicitud de patente a presentar.